┌── 1. 临床样本验证 NLRP3/...
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┌── 1. 临床样本验证 NLRP3/焦亡通路在 IUA 中的激活状态
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├───── 1.1 临床组织水平研究
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│ ├─ 收集样本:IUA患者 vs 正常女性子宫内膜组织,各15例
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│ ├─ 分子水平检测
│ │ ├─ 免疫组化、Western blot、qPCR
│ │ ├─ 检测:NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18
│ │ └─ 定位与表达水平分析
│ │
│ ├─ 细胞定位验证
│ │ └─ 免疫荧光双染:Vimentin / GSDMD‑N
│ │ 明确焦亡是否发生于子宫内膜基质细胞(ESCs)
│ │
│ ├─ 纤维化指标检测
│ │ ├─ α‑SMA、Collagen I
│ │ └─ 胶原沉积程度评估
│ │
│ └─ 统计分析
│ ├─ 均值±标准差表示
│ ├─ 组间比较:非配对t检验 / Mann‑Whitney U
│ ├─ 相关性:Pearson / Spearman
│ └─ P < 0.05 为差异有统计学意义
│
└───── 1.2 体外细胞水平验证
│
├─ 分离原代子宫内膜基质细胞(ESCs)
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├─ 建立体外炎症刺激模型
│ └─ LPS + ATP 诱导 NLRP3 激活
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└─ 观察焦亡特征
├─ 细胞形态:肿胀、破裂
├─ LDH 释放水平
└─ IL‑1β、IL‑18 分泌水平
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